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紫外分光光度法测定毛丁白头翁中总苷类的含量
发布时间:2017/5/18 点击次数:26次

UV1901PC88必发官网法测定毛丁白头翁中总苷类的含量

 

测定毛丁白头翁植物的根及根茎中总苷类的含量。

毛丁白头翁植物的根及根茎中总苷类简介

临床上主要用于感冒发热、咳嗽痰多、痢疾、小儿疳积,外用治跌打损伤、毒蛇咬伤…等。毛丁白头翁的主要化学成分为总苷类,近年来对毛丁白头翁提取物中总苷类的含量的测定报道甚少,此实验选用常用的回流提取法提取毛丁白头翁药材,选用熊果苷为对照品(熊果苷是毛丁白头翁提取物中总苷类中的一个主要成分且在医药方面熊果苷有着极其重要和广泛的应用)用紫外分光光度法对毛丁白头翁提取物中的总苷类含量进测定,方法准确,快速,重现性好,可作为毛丁白头翁药材中内在质量评价的重要依据。

 

实验方法:采用UV1901PC88必发官网,检测波长为286nm,线性范围为16.037.0ug/ml,相关系数为0.9999,平均回收率为100.6%,RSD2.313%(n=6)

 

仪器与材料

仪器:UV1901型紫外可见分光光度计(88必发娱乐官网)

电子天平。旋转蒸发仪。

 

 

材料:毛丁白头翁95%乙醇,乙酸乙酯,均为分析纯。

方法与结果

2.1 测定波长的选择

精密称取熊果苷对照品2.0mg,10ml容量瓶中,95%乙醇配制成O.2mg/ml的溶液,摇匀,95%乙醇为空白,将待测液盛于比色皿中,置于比色池中,200800nm波长段扫描。结果表明毛丁白头翁提取物中总苷类在223nm286nm处有最大吸收峰,但由于在286nm波长处的峰形较223nm波长处的峰形完好且286nm处受到杂质的干扰小,故选286nm作为毛丁白头翁提取物中总苷类的测定波长。

2.2 标准曲线的绘制

精密称取熊果苷对照品5.3mg,10ml容量瓶中,95%乙醇溶解并定容成0.53mg/ml,作为贮备液。精密吸取贮备液5ml,50ml的容量瓶中,95%乙醇溶解并定容成0.053mg/ml的标准溶液,精密吸取标准品溶液3,4,5,6,7ml,分别置于10ml容量瓶中,95%乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,使浓度分别为16.0,21.0,27.0,32.0,37.Oug/ml,95%乙醇作空白,将待测液盛于比色皿中,置于比色池中,于波长286nm处测定吸收度,结果见下图。

 

所测结果经回归得回归方程:y=9.24827x-0.01474(r=0.9999)。结果表明:熊果苷对照品溶液

16.037.0ug/ml浓度范围内,浓度与吸收度线性关系良好。

2.3 精密度试验

精密吸取浓度为0.053mg/ml的熊果苷对照品溶液4ml置于10ml容量瓶中,95%乙醇稀释至刻度,摇匀,95%乙醇作

空白,将待测液盛于比色皿中,置于比色池中,于波长286nm处测定吸收度,结果见表1

UV1901PC88必发官网精密度实验结果结果表明:仪器精密度良好。

2.4 稳定性试验

2.4.1 样品溶液的制备

精密称取毛丁白头翁粉末1.25g,加入40m195%乙醇,热回流提取三次,每次1h.将得到的总提物合并后抽滤,然后减压回收95%乙醇,将得到浓缩物用蒸馏水溶解,然后用乙酸乙酯萃取水液五次,弃去乙酸乙酯萃取液,将得到的水液移到蒸发皿中,70℃水浴锅上蒸干水分,残渣用95%乙醇溶解并转入25ml容量瓶中,95%乙醇稀释至刻度,摇匀,作为测定总苷类的供试品溶液。2.4.2 样品溶液和对照品溶液稳定性的测试精密吸取浓度为0.053mg/ml的熊果苷对照品溶液10ml,毛丁白头翁样品液0.5ml分别置于25ml容量瓶中,95%乙醇稀释至刻度,摇匀,95%乙醇作空白,将待测液盛于比色皿中,置于比色池中,于波长286nm处测定吸收度,时间间隔为30min.

UV1901PC88必发官网法稳定性实验结果

  结果表明:对照品溶液和样品溶液的稳定性在4小时内良好。

2.5 重现性试验

精密称取毛丁白头翁根和根茎的粉末6,照样品项下制得样品液。从样品液中精密吸取0.5ml置于25ml容量瓶中,95%乙醇稀释至刻度,摇匀,95%乙醇作空白,将待测液盛于比色皿中,置于比色池中,于波长286nm处测定吸收度,按标准曲线项下的回归方程计算含量,结果见表3

UV1901PC88必发官网法重现性实验结果

原药材中总苷类百分含量(%)RSD(%)

2.1702.0522.1292.0512.0852.075

2.246

  结果表明:重现性较好。

2.6 加样回收率试验

精密称取毛丁白头翁根和根茎粉末6,照样品项下制得样品液。精密吸取0.5ml置于25mi

容量瓶中,精密加入熊果苷对照品液,95%乙醇稀释至刻度,摇匀,于波长286nm处测定吸收度,并计算回收率.

 紫外分光光度法熊果苷回收率实验结果

样品含熊果苷(mg)加入熊果苷(mg)实测量(mg)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)

2.7 样品测定

精密吸取毛丁白头翁样品溶液0.5ml置于25ml容量瓶中,95%乙醇稀释至刻度,摇匀,95%乙醇作空白,将待测液盛于比色皿中,置于比色池中,于波长286nm处测定吸收度,按标准曲线项下的回归方程计算含量,结果见表5。表毛丁白头翁总苷类的含量测定结果(紫外可见分光光度法)

UV1901PC88必发官网测定毛丁白头翁提取物中总苷类的含量在16.037.0ug/ml浓度范围内线性关系良好(r=0.9999)。毛丁白头翁样品液中总苷类的回收率为100.6%。该方法简便、准确、重现性好。

UV1901PC88必发官网具有简便易行的特点,用此法测定毛丁白头翁植物中总苷类的含量并以此含量作为此药材的质量控制的一个方面有一定的实际意义。


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